小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的鑒定方法

　　小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。

　　成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。

　　小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來。

　　小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的方法及其鑒定和生物學(xué)特性。方法：密度梯度離心法分離獲取小鼠骨髓單核細(xì)胞，培養(yǎng)于培養(yǎng)液中，每天于倒置顯微鏡下觀察EPC的形態(tài)。應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光法、流式細(xì)胞技術(shù)鑒定EPC表面抗原標(biāo)志CD34、血管內(nèi)皮生長因子受體，熒光顯微鏡檢測EPC吞噬DiI標(biāo)記的乙?；兔芏戎鞍准敖Y(jié)合FITC標(biāo)記的荊豆凝集素功能。

　　注意事項(xiàng)

　　1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

　　2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。

　　3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。